Penilaian in situ aktivitas pernapasan mitokondria dan metabolisme lipid oosit tikus menggunakan spektroskopi Raman resonansi

Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan suatu metode untuk mengetahui derajat pematangan oosit pada metafase II . di tempat berdasarkan keseimbangan antara aktivitas pernapasan mitokondria dan metabolisme lipid menggunakan spektroskopi resonansi Raman. Penurunan aktivitas pernapasan oosit yang terlalu matang ditunjukkan oleh berkurangnya intensitas pita Raman resonansi yang sesuai dengan penurunan sitokrom. C dalam sitoplasma. Selain itu, peningkatan konsentrasi lipid pada oosit yang terlalu matang menunjukkan metabolisme lipid yang lebih rendah dengan penurunan fungsi mitokondria. Indeks baru didefinisikan dalam hal rasio intensitas puncak Raman yang representatif dari sitokrom tereduksi C (750 dan 1127 cm¹) dengan lipid (1438 cm¹ ) dan mereka berhasil mengklasifikasikan oosit ke dalam kelompok berdasarkan kualitasnya, yang bervariasi dengan tingkat pematangannya. Tingkat perkembangan embrio yang tinggi yang dibuahi in vitro setelah iradiasi laser menunjukkan bahwa iradiasi laser tidak invasif terhadap oosit. Evaluasi dua faktor di tempat, respirasi aktif dan metabolisme lipid, berarti menangkap reaksi biokimia paling mendasar dari aktivitas kehidupan. Hasil kami menunjukkan potensi penerapan spektroskopi resonansi Raman sebagai teknologi evaluasi sel baru, noninvasif, dan universal, tidak hanya untuk oosit tetapi juga sel yang lebih umum seperti sel somatik dan sel iPS.