Reduksi elektrokimia sebaris NISTmAb untuk analisis spektrometri massa kromatografi cair subunit menengah ke atas

Pengurangan ikatan disulfida dalam alur kerja spektrometri massa antibodi biasanya dilakukan dengan menggunakan zat pereduksi kimia untuk menghasilkan subunit antibodi untuk analisis menengah ke bawah dan menengah ke atas. Dalam kontribusi ini kami menawarkan metode reduksi elektrokimia online untuk reduksi antibodi yang digabungkan dengan kromatografi cair (LC) dan spektrometri massa (MS), mengurangi ikatan disulfida yang ada dalam antibodi tanpa memerlukan zat pereduksi kimia. Sel elektrokimia yang ditempatkan sebelum kolom analitik dan spektrometer massa memfasilitasi reduksi lengkap ikatan disulfida antar dan intrarantai NISTmAb. Reduksi dan analisis dilakukan di bawah kondisi pelarut yang optimal menggunakan kolom trapping dan katup switching untuk memfasilitasi pertukaran pelarut selama analisis. Tingkat reduksi terbukti dipengaruhi oleh potensial elektrokimia, suhu dan kandungan organik pelarut, tetapi dengan optimasi, pemutusan ikatan disulfida lengkap tercapai. Penggunaan sel elektrokimia inline menawarkan solusi alur kerja yang sederhana dan cepat untuk analisis spektrometri massa kromatografi cair dari subunit antibodi.